ХРОМАТОФОКУСИРОВАНИЕ БИПОЛЯРНЫХ СОЕДИНЕНИЙ
НА КАТИОНООБМЕННЫХ КОЛОНКАХ С ПОМОЩЬЮ ПРОСТЫХ ПОДВИЖНЫХ ФАЗ

А.В.Иванов¹, М.С.Вакштейн²

¹Московский государственный университет им. М.В.Ломоносова, химический факультет; 119992, г. Москва, ГСП-2, Ленинские горы;
e-mail: sandro@analyt.chem.msu.ru
²ФГУП «НИИ прикладной акустики», Центр высоких технологий,
г. Дубна, Московская обл.

Изучено формирование восходящих градиентов рН внутри колонок, заполненных катионообменниками с привитыми карбоксильными или сульфогруппами, при использовании элюентов простого состава (1 – 2 компонента). Оптимальные подвижные фазы для карбоксильных колонок содержат лимонную кислоту (2 – 5 мМ) и Трис (1,5 – 20 мМ), для сульфокатионообменной колонки – NaH₂PO₄ (3 – 10 мМ) и Трис (до 6 мМ) в качестве активных компонентов. Наиболее плавные, практически линейные градиенты рН в карбоксильных колонках формируются при создании ионной силы 0,05 – 0,5 в одной или обеих подвижных фазах – стартовом растворе и элюенте. В случае сульфокатионита предпочтительнее создавать в подвижных фазах ионную силу 0,1 – 0,3. Полученные градиенты сравнимы с градиентами рН, сформированными при использовании синтетического полиамфолитного элюента "Полибуфер-96". Возможности аналитического применения простых элюентов в хроматофокусировании показаны на примерах разделения модельной смеси белков, изоформ формиатдегидрогеназы и трипсинового гидролизата белка.

Ключевые слова: хроматофокусирование, простые элюенты, линейные градиенты рН, карбоксильные и сульфокатионообменные колонки

Назад